血清使用中的常見問題

血清使用中的常見問題

有關(guān)血清的問題，數(shù)十年來我們始終面臨的是同樣的問題。因此，我們特別整理了一些實(shí)驗(yàn)室里常會(huì)遇到的問題，供大家參考：
1、保存血清的方法是什么？
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。但是，若存放于4℃時(shí)，請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。反復(fù)凍融會(huì)對血清的品質(zhì)造成不良影響。反復(fù)冰凍融化過程會(huì)使血清中的某些物質(zhì)沉淀，降低血清的使用效果。不適當(dāng)?shù)馁A存將迅速降低血清制品的有效成分和穩(wěn)定性。
2、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損? 
我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。解凍血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至 37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
3、為什么胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀（絮狀物）？如何處理？
胎牛血清，所以在解凍過程（包括沒有*解凍）或儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等）可能會(huì)聚集成團(tuán)，形成絮狀沉淀或外觀混濁；血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多。在運(yùn)輸過程中，由于時(shí)間較長，所以往往有少許解凍，因此也可能稍有沉淀，但這些都不影響血清性能質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
4、何謂熱滅活?
一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
5、批間差：
所有的血清都是一種成分不確定的混合物，批與批血清之間的組分存在差異。

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產(chǎn)品應(yīng)用：

1)組織和細(xì)胞培養(yǎng)

2)診斷實(shí)驗(yàn)研究

3)一些特殊稀釋液的添加劑

4)疫苗生產(chǎn)

5)免疫實(shí)驗(yàn)中的封閉劑

6)一些特定蛋白配體的穩(wěn)定劑