GMP級干細胞細胞凍存液 Cryopreservation Media

產(chǎn)品描述：

STEM-CELLBANKER ®是GMP下生產(chǎn)的ES細胞和iPS細胞凍存液 產(chǎn)品特點是化學成分清晰，無動物源成分，專門針對ES細胞和iPS細胞特點設計的細胞凍存液。STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求，是干細胞治療和應用合適的細胞凍存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊設備和儀器就可以實現(xiàn)干細胞高存活率的凍存和長達10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細胞活力，同時保持細胞多能性，和細胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達到的。

產(chǎn)品特點：

1）化學成分清楚和無動物源成分

2）按照日本，歐盟，美國和PIC/SGMP指南生產(chǎn)

3）復蘇后保持細胞的高活力

4）解凍復蘇后依然保持干細胞的多能性

5）實現(xiàn)細胞的長期凍存，不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

6）可以不需要液氮就可以長期保存

7）同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細胞凍存

8）STEM-CELLBANKER 已經(jīng)得到美國食品藥物管理局的認證（生物制品評價和研究中心）

STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求，是干細胞治療和應用合適的細胞凍存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊設備和儀器就可以實現(xiàn)干細胞高存活率的凍存和長達10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細胞活力，同時保持細胞多能性，和細胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達到的。

應用實例：

圖1 STEM-CELLBANKER對人體胚胎干細胞（hESC） 和誘導多能（iPS）干細胞進行凍存測試

測試凍存液：STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規(guī)細胞凍存液（細胞培養(yǎng)基 + 10% DMSO + 血清代替品）

細胞存活率評估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit試劑盒

測試結果：使用STEM-CELLBANKER凍存液的細胞存活率明顯提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常規(guī)細胞凍存液高一倍。同時，結果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

圖2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10％福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKER的ø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10％福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中，壞死或細胞凋亡的跡象都可以忽略不計。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結果。

圖3.總RNA從小鼠肺成纖維細胞系的任收獲后立即或在-80與STEM-CELLBANKER凍存后的細胞中提取ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個樣品中的mRNA水平，結果顯示93％的mRNA在±1.6倍差異的范圍內(nèi)。

細胞株：129SV (Mouse ES cell)

測試凍存液：ZENOAQ 產(chǎn)品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）

常規(guī)自培凍存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖：

使用手冊:

細胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數(shù)生長數(shù)的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1. 按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

2. 按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。

（參考：5×10⁵ 至 5×10⁶ cells/ml）。

3. 取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去離心管中的上清液。

4. 加入適量的CELLBANKER? 細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為 5×105 至 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。

5. 將離心管中的細胞混合液分裝于已標示*的冷凍保存管中。

6. 直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

7. 若研究者需要液氮保存時，可將*凍結的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細胞復蘇方法：

1. 從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃ 振動水浴槽中快速解凍。

2. 待凍存管中細胞混合液*融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。

3. 離心收集培養(yǎng)細胞((參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4. 清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。

5. 加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。

6. 鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

儲存方法和保質(zhì)期

儲存于４℃以下。 保質(zhì)期３年。3個月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計劃時，盡可冷凍保存。為避免重復凍結-解凍過程可能導致的CELLBANKER品質(zhì)下降和性能降低，推薦將 100mL 產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱凍存。

質(zhì)量保障承諾

1. STEM-CELLBANKER 細胞凍存液經(jīng)過嚴格內(nèi)毒素、pH、滲透壓和微生物檢查，確保產(chǎn)品不含細菌、霉菌以及支原體。

2. 使用小鼠胚胎干細胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007細胞驗證性能測試凍存細保存活率達8０％以上。

注意事項

1) CELLBANKER系列產(chǎn)品只供實驗室研究使用，是試劑級產(chǎn)品。

2)我們推薦用戶在使用本產(chǎn)品之前，事先對所使用的細胞進行至少為期 1 周的

試驗性細胞冷凍保存培養(yǎng)。確認性能后再進行正式凍存。

免責聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時所發(fā)生的意外負責。

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